ההגדרה המילונית של "כתם נגדי" היא טכניקת צביעה המשמשת במיקרוסקופיה כדי להחיל כתם מנוגד שני על דגימה ביולוגית לאחר החלת הכתם הראשוני, על מנת לשפר את הניגודיות ולשפר את הנראות של מבנים או רכיבים מסוימים בתוך המדגם. לעתים קרובות נעשה שימוש בצביעה נגדית בשילוב עם טכניקות צביעה ראשוניות כגון צביעת המטוקסילין ואאוזין, והוא נפוץ בשימוש בהיסטולוגיה ופתולוגיה כדי לסייע באבחון מחלות ומצבים רפואיים אחרים.